Mnk2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421658

概要

マウスのMknk2は、MAPキナーゼ相互作用性セリン/スレオニンプロテインキナーゼ2（Mnk2）をコードしている。Mnk2はERKおよびp38 MAPKシグナル伝達の下流エフェクターであり、eIF4EやmRNAキャップ依存的翻訳装置の関連因子をリン酸化することで翻訳開始を調節する。この結節点を介して、Mnk2はストレス刺激および増殖因子刺激を統合し、選択的mRNA翻訳を制御して、細胞増殖、生存、炎症応答に影響を与える。MNK–eIF4E軸の活性変化は、がん生物学や免疫介在性疾患で観察されるタンパク質合成プログラムの破綻と関連づけられており、Mknk2はマウスモデルにおけるMAPK駆動性の翻訳制御を解析するための有用な入り口となる。Mnk2の機能解析はまた、シグナル伝達のクロストーク、即時早期遺伝子応答、ストレス下における状況依存的な翻訳の研究にも資する。

Mnk2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMknk2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mknk2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mknk2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mnk2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mnk2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mknk2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mnk2の機能に不可欠なMknk2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mknk2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Mnk2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMnk2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mknk2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Mnk2 HDRプラスミド（m）および Mnk2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMknk2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMknk2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。