MMP-21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414131

概要

MMP21は、マトリックスメタロプロテアーゼ21（MMP-21）をコードしています。MMP-21は分泌型の亜鉛依存性エンドペプチダーゼで、マトリックス成分や細胞表面基質を切断することで細胞外マトリックス（ECM）のリモデリングに寄与します。MMPプロテアーゼネットワークの一員として、MMP-21は細胞周囲のプロテオリシス、基底膜ダイナミクス、ならびに上皮—間葉相互作用を形作る細胞—マトリックス間シグナル伝達に影響を与えます。これらの作用は、インテグリン介在性接着、増殖因子の利用可能性（バイオアベイラビリティ）、炎症に伴う組織リモデリングなど、遊走・浸潤プログラムに関連する経路とも交差します。MMP21の発現変化は、異常なマトリックス代謝回転が病態進行に伴う複数の病理学的状況で報告されており、マトリックス生物学における機構的な結節点としての有用性を支持しています。

MMP-21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMMP21遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MMP21内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MMP21のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MMP-21タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MMP-21シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MMP21欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MMP-21の機能に不可欠なMMP21エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MMP21ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MMP-21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMMP-21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MMP21遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MMP-21 HDRプラスミド（h）および MMP-21 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMMP21ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMMP21標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。