Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO MMP-21 (h): sc-414131
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- MMP-21 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique MMP-21, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MMP-21 Antibody (C-7): sc-398935
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO MMP-21 (h) | sc-414131 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MMP21 code la métalloprotéinase matricielle 21 (MMP‑21), une endopeptidase sécrétée dépendante du zinc qui contribue au remodelage de la matrice extracellulaire en clivant des substrats de la matrice et de la surface cellulaire. En tant que composante du réseau de protéases MMP, MMP‑21 influence la protéolyse péricellulaire, la dynamique de la membrane basale et la signalisation cellule–matrice qui façonnent les interactions épithélio‑mésenchymateuses. Ces activités recoupent des voies associées aux programmes de migration et d’invasion, notamment l’adhésion médiée par les intégrines, la biodisponibilité des facteurs de croissance et le remodelage tissulaire inflammatoire. Une expression altérée de MMP21 a été rapportée dans de multiples contextes pathologiques où un renouvellement anormal de la matrice accompagne la progression de la maladie, ce qui étaye son intérêt en tant que nœud mécanistique de la biologie de la matrice.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MMP-21 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MMP21 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MMP21, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MMP21 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MMP-21.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MMP21 pour l'étude de la signalisation de MMP-21, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MMP21 essentiels à la fonction de MMP-21
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MMP21 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le MMP-21 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le MMP-21 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MMP21. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le MMP-21 plasmide HDR (h) et le MMP-21 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MMP21 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MMP21 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.