MLKL Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428931-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MLKLO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MLKL (m) e o Plasmídeo Double Nickase MLKL (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mlkl. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MLKL Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428931-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MLKL Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428931-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MLKL (mixed lineage kinase domain-like) de camundongo é um efetor terminal da necroptose, uma via programada de morte celular lítica desencadeada a jusante da sinalização de RIPK1/RIPK3. Após fosforilação por RIPK3, a MLKL oligomeriza, transloca-se para as membranas celulares e compromete a integridade da membrana, conectando o reconhecimento imune inato ao dano inflamatório e à liberação de DAMPs. A necroptose dependente de MLKL intersecciona-se com a sinalização do receptor de TNF, respostas a interferons e programas de defesa contra patógenos, modulando a homeostase tecidual durante inflamação estéril e infecção. A atividade desregulada de MLKL tem sido implicada em modelos de doenças inflamatórias e degenerativas, nos quais a perda celular por necroptose contribui para a patologia.
MLKL O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mlkl em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mlkl. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mlkl. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mlkl interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.