MIZIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426433
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIZIP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MIZIP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIZIP Anticorpo (E-4): sc-398514
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIZIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426433 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Zmynd19 codifica o MIZIP, uma proteína associada a dedos de zinco que interage com MYC e está implicada na regulação de programas transcricionais ligados ao crescimento e à diferenciação celular. Por meio de sua associação com MYC e com complexos proteicos putativos mediados por dedos de zinco, acredita-se que o MIZIP influencie redes de expressão gênica que coordenam a proliferação, o metabolismo celular e a especificação de linhagens. Alterações no controle transcricional centrado em MYC são amplamente relevantes para fenótipos oncogênicos e do desenvolvimento, tornando o Zmynd19 um ponto útil para dissecar a regulação transcricional dependente do contexto. Em sistemas murinos, a perturbação do MIZIP pode ajudar a esclarecer como co-reguladores moldam vias acionadas por MYC e os estados celulares resultantes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MIZIP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zmynd19 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zmynd19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zmynd19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MIZIP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zmynd19 para a investigação da sinalização de MIZIP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zmynd19 críticos para a função MIZIP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zmynd19 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MIZIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MIZIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zmynd19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MIZIP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MIZIP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zmynd19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zmynd19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.