Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MISR II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402523
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MISR II O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MISR II, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MISR II Anticorpo (D-9): sc-377413
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MISR II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402523 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
AMHR2 codifica o recetor humano da hormona anti-Mülleriana tipo 2 (MISR II), uma serina/treonina cinase transmembranar que se liga à AMH e inicia a sinalização via SMAD1/5/8 para regular programas de desenvolvimento no ducto de Müller e a diferenciação gonadal. A ativação do recetor coordena respostas transcricionais envolvidas em decisões de destino celular, remodelação tecidular e maturação do trato reprodutor, integrando-se com a dinâmica mais ampla das vias TGF-β/BMP. A desregulação da sinalização AMH–AMHR2 tem sido associada a perturbações do desenvolvimento sexual e a fenótipos de endocrinologia reprodutiva, e a expressão alterada de MISR II tem sido investigada em contextos tumorais derivados do ovário e de outras linhagens müllerianas. Como nó de via, o AMHR2 é útil para estudar a sinalização recetor-dependente induzida por ligando, a regulação génica mediada por SMAD e respostas de crescimento e diferenciação específicas do contexto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MISR II (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AMHR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AMHR2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AMHR2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MISR II.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AMHR2 para a investigação da sinalização de MISR II, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AMHR2 críticos para a função MISR II
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AMHR2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MISR II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MISR II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AMHR2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MISR II Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MISR II (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AMHR2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AMHR2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.