MGAT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414091
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MGAT1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MGAT1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MGAT1 Anticuerpo (H-6): sc-376079
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MGAT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-414091 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El MOGAT1 humano codifica la monoacilglicerol O-aciltransferasa 1 (MGAT1), una enzima de membrana del retículo endoplásmico que cataliza la acilación del monoacilglicerol para formar diacilglicerol, un intermediario clave en la biosíntesis de triacilglicéridos. Al controlar el equilibrio entre monoacilglicerol, diacilglicerol y los compartimentos lipídicos posteriores, MGAT1 contribuye a la formación de gotículas lipídicas y a una homeostasis lipídica celular más amplia. La actividad alterada de MGAT1 se ha vinculado a fenotipos metabólicos, incluida la desregulación de la acumulación de lípidos hepáticos y de la señalización de la insulina, y se estudia en el contexto de la esteatosis asociada a la obesidad y de vías relacionadas de estrés inflamatorio. Estas funciones hacen de MOGAT1 una diana relevante para investigar la reprogramación del metabolismo lipídico y la regulación específica por órgano del almacenamiento de lípidos neutros.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MGAT1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MOGAT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MOGAT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MOGAT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MGAT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MOGAT1 para la investigación de la señalización de MGAT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MOGAT1 críticos para la función de MGAT1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MOGAT1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MGAT1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MGAT1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MOGAT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MGAT1 (h) y el plásmido HDR MGAT1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MOGAT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MOGAT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.