Plásmido CRISPR de Activación (h) Mex3c: sc-408878-ACT
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) Mex3c es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) Mex3c incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Los gRNA codificados por el plásmido de activación CRISPR Mex3c (h) y el plásmido de activación CRISPR Mex3c (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas situadas aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción de MEX3C. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Mex3c Anticuerpo (D-10): sc-398440
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido CRISPR de Activación (h) Mex3c | sc-408878-ACT | 20 µg | $397.00 |
El gen humano MEX3C codifica Mex3c, una proteína de unión a ARN que contiene dominios KH y un dominio tipo RING finger C3H1, el cual favorece la regulación génica posranscripcional mediante la unión selectiva por secuencia a mRNAs, su localización y el control de su estabilidad. Mex3c participa en redes de metabolismo del ARN que influyen en programas de traducción y en la diferenciación celular, conectándola con la proteostasis y la adaptación de la señalización ante cambios en el estado metabólico. Entre las conexiones funcionales descritas se incluyen la regulación del recambio de mRNA y procesos asociados a la ubiquitina que moldean el crecimiento celular y las respuestas al estrés. Se ha observado una expresión desregulada de MEX3C en firmas transcripcionales relevantes para enfermedades, lo que respalda su estudio en los mecanismos que subyacen a la disfunción metabólica y a la remodelación de la regulación del ARN asociada al cáncer.
Mex3c El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de MEX3C sin alterar la secuencia de ADN subyacente.
Mex3c El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus MEX3C en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.
Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional MEX3C, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de Mex3c. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo MEX3C y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de Mex3c en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía Mex3c en células tumorales con expresión de MEX3C silenciada o reducida.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.