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METTL7B双切口酶质粒(h) | sc-408340-NIC | 20 µg | $410.00 |
METTL7B(methyltransferase-like 7B)编码一种推定的、依赖 S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)的甲基转移酶,主要定位于内膜系统细胞区室。据报道,它参与调控脂质相关代谢以及细胞应激反应。METTL7B 的表达与影响膜稳态、炎症信号传导和氧化还原平衡的通路有关,这与其在多种细胞类型中参与代谢重塑的关联相一致。在多个与疾病相关的情境中都观察到 METTL7B 水平的改变,包括肿瘤生物学以及与神经退行性变相关的转录程序,因此它是研究情境依赖性基因调控的一个有用节点。对 METTL7B 进行功能性解析可支持甲基化依赖的蛋白质或小分子修饰机制研究,以及这些修饰对细胞状态的下游影响。
METTL7B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 METTL7B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对METTL7B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏METTL7B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了METTL7B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。