METTL6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416547-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- METTL6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase METTL6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase METTL6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para METTL6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:METTL6 Anticorpo (F-8): sc-515214
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
METTL6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416547-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
METTL6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416547-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL6 codifica uma metiltransferase dependente de S-adenosil-L-metionina implicada na modificação de RNA, com atividade descrita sobre tRNAs citosólicos específicos, podendo influenciar a fidelidade da tradução e a produção do proteoma. Ao moldar padrões de metilação de tRNA, o METTL6 está ligado a processos celulares como controle translacional, proteostase e adaptação ao estresse, que podem afetar secundariamente programas de proliferação e diferenciação. A desregulação de enzimas de modificação de RNA, incluindo metiltransferases de tRNA, tem sido associada a fenótipos de crescimento alterados e ao acoplamento entre transcriptoma e proteoma em contextos de doenças humanas, tornando o METTL6 um alvo relevante para estudos mecanísticos. Em modelos de células humanas, a perturbação de METTL6 permite investigar como marcas epitranscriptômicas em tRNA se integram à regulação da expressão gênica e às transições de estado celular.
METTL6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus METTL6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de METTL6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função METTL6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com METTL6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.