METT10D CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-408605
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- METT10D CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在METT10D基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
METT10D CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-408605 | 20 µg | $397.00 |
概述
人类 METTL16（METT10D）编码一种依赖 S-腺苷-L-蛋氨酸（SAM）的 RNA 甲基转移酶，可在具有特定结构的 RNA 底物上安装 N6-甲基腺苷（m6A），从而将 RNA 修饰与 RNA 代谢的调控联系起来。METTL16 介导的甲基化可通过影响 RNA 结构及核糖核蛋白复合体的组装，进而影响 pre-mRNA 剪接、RNA 稳定性与翻译；此外，它还通过调控 MAT2A 转录本的加工与细胞甲基供体稳态的调节相关联。凭借这些功能，METTL16 参与塑造细胞生长与应激适应的基因表达程序，因此在发育与疾病背景下的表转录组调控研究中具有重要意义。多种癌症与神经生物学研究模型中观察到的 RNA 加工失调及增殖信号异常表型，也被认为与 METTL16 活性改变有关。
METT10D CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中METTL16基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对METTL16基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏METTL16开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使METT10D蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建METTL16缺失的细胞模型，用于METT10D信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 METT10D 功能至关重要的 METTL16 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 METTL16 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 METT10D CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 METT10D CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 METTL16 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 METT10D HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 METT10D HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由METTL16同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定METTL16靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。