Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MCT4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418517-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCT4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCT4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MCT4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC16A3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCT4 Anticorpo (D-1): sc-376140
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCT4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418517-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCT4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418517-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O SLC16A3 codifica o transportador de monocarboxilatos 4 (MCT4), um simportador acoplado a H+ na membrana plasmática que exporta lactato e outros monocarboxilatos para regular o pH intracelular e sustentar o metabolismo glicolítico. O MCT4 atua na reprogramação metabólica ao apoiar a rápida regeneração de NAD+ e limitar o stress ácido, integrando-se a programas transcricionais associados à hipóxia e ao HIF-1. A sua atividade molda o microambiente extracelular por meio do efluxo de lactato, influenciando o equilíbrio redox, a distribuição de nutrientes e o acoplamento metabólico entre células. A expressão desregulada de SLC16A3/MCT4 está associada a estados de alta glicólise e tem sido implicada no metabolismo do cancro e noutras doenças ligadas à alteração do manuseamento de lactato e da homeostase do pH.
MCT4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC16A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC16A3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC16A3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC16A3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.