MCT3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403973-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCT3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCT3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MCT3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC16A8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCT3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCT3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC16A8 codifica o transportador de monocarboxilatos 3 (MCT3), um transportador de solutos acoplado a prótons que medeia o transporte transmembranar de lactato e outros monocarboxilatos, sustentando a homeostase do pH celular e o acoplamento metabólico. Nos tecidos oculares humanos, o MCT3 encontra-se enriquecido no epitélio pigmentar da retina e contribui para o efluxo de lactato da retina externa, ligando o fluxo glicolítico ao metabolismo oxidativo através de barreiras epiteliais. Como membro da família SLC16, o MCT3 atua em vias mais amplas de transporte de monocarboxilatos e de regulação ácido–base que influenciam o equilíbrio redox e a sinalização por metabólitos. Alterações no manuseio de monocarboxilatos e a desregulação do transporte de lactato têm sido implicadas na fisiologia retiniana e em processos relevantes para doenças, tornando o SLC16A8 um alvo útil para investigar mecanismos de transporte metabólico.
MCT3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC16A8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC16A8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC16A8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC16A8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.