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MCM5双切口酶质粒(h) | sc-401980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCM5双切口酶质粒(h2) | sc-401980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM5 编码微小染色体维持蛋白(MCM2–7)解旋酶复合体的核心亚基之一,该复合体负责对复制起始点进行许可,并在 S 期推动 DNA 解旋。MCM5 通过协调复制起始、复制叉推进以及复制体稳定性,促进基因组完整性维持,并通过 S 期与 G2/M 检查点确保细胞周期有序过渡。MCM5 表达失调或复制许可过程异常与复制压力、染色体不稳定性以及多种癌症背景下观察到的增殖表型相关。作为复制因子,MCM5 常用于研究 DNA 复制时序、检查点信号传导,以及复制与 DNA 损伤应答相耦联的机制。
MCM5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MCM5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCM5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MCM5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MCM5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。