Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MCM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401980
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCM5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MCM5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCM5 Anticorpo (E-10): sc-165994
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401980 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MCM5 codifica uma subunidade central da helicase MCM2–7, que licencia as origens de replicação e promove o desenrolamento do DNA durante a fase S, como parte dos complexos de pré-replicação e CMG (CDC45–MCM–GINS). Ao coordenar o disparo das origens e a progressão das forquilhas de replicação, o MCM5 contribui para a estabilidade do genoma e interage com vias de resposta a danos no DNA e de checkpoints que restringem a síntese aberrante de DNA. A expressão ou atividade desregulada de proteínas da família MCM é frequentemente associada a maior capacidade proliferativa e a assinaturas de estresse replicativo observadas em múltiplos contextos tumorais, apoiando seu uso como marcador mecanístico em estudos do ciclo celular e de manutenção do genoma.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MCM5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MCM5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MCM5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MCM5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MCM5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MCM5 para a investigação da sinalização de MCM5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MCM5 críticos para a função MCM5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MCM5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MCM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MCM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MCM5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MCM5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MCM5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MCM5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MCM5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.