MCM3AP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406369
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MCM3AP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MCM3AP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MCM3AP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406369 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MCM3AP (proteína asociada a MCM3) es un factor nuclear multifuncional que interactúa con el complejo helicasa MCM2–7 y contribuye a la regulación de la replicación del ADN y la progresión del ciclo celular. Se ha relacionado con procesos que coordinan el licenciamiento de la replicación con el control transcripcional y el metabolismo del ARN, lo que refleja funciones en el mantenimiento del genoma y la capacidad proliferativa. La alteración o expresión modificada de MCM3AP se ha investigado en el contexto del estrés replicativo, la señalización asociada a la cromatina y las respuestas celulares al daño del ADN que influyen en la estabilidad genómica. Estos mecanismos se estudian con frecuencia en biología del cáncer y otros trastornos proliferativos, donde los conflictos entre replicación y transcripción y la disfunción de los puntos de control son temas de investigación destacados.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MCM3AP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MCM3AP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MCM3AP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MCM3AP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MCM3AP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MCM3AP para la investigación de la señalización de MCM3AP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MCM3AP críticos para la función de MCM3AP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MCM3AP para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MCM3AP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MCM3AP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MCM3AP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MCM3AP (h) y el plásmido HDR MCM3AP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MCM3AP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MCM3AP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.