MCH-1R Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431527-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCH-1RO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCH-1R (m) e o Plasmídeo Double Nickase MCH-1R (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mchr1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCH-1R Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431527-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCH-1R Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431527-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mchr1 codifica o receptor 1 do hormônio concentrador de melanina (MCH-1R), um GPCR de classe A que se acopla principalmente a Gi/o para modular a sinalização de cAMP, a mobilização de cálcio e vias de quinases a jusante, como MAPK/ERK, em neurônios. Em camundongos, o MCH-1R é enriquecido em circuitos do SNC que integram o balanço energético, o comportamento alimentar, a vigília e o processamento de recompensa, ligando a atividade do receptor à regulação neuroendócrina. Alterações na sinalização de Mchr1 têm sido estudadas em modelos relevantes para obesidade, desregulação metabólica e fenótipos neuropsiquiátricos, nos quais mudanças na excitabilidade sináptica e no tônus neuromodulador contribuem para desfechos em nível de sistema. Como um nó de GPCR, o MCH-1R também oferece um ponto de entrada tratável para dissecar o tráfego do receptor, a dessensibilização e a sinalização enviesada por vias em contextos celulares nativos.
MCH-1R O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mchr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mchr1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mchr1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mchr1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.