MBNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406573
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MBNL3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MBNL3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MBNL3 Anticorpo (5A11): sc-136168
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MBNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406573 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MBNL3 (regulador de splicing tipo muscleblind 3) é uma proteína de ligação a RNA que reconhece motivos YGCY em pré-mRNAs para controlar o splicing alternativo, a estabilidade do mRNA e sua localização. Ela participa de programas de regulação gênica pós-transcricional que moldam transições de estado celular, incluindo decisões de splicing associadas à diferenciação e a seleção de isoformas de transcritos específicas de tecido. As proteínas da família MBNL são nós centrais em redes de processamento de RNA ligadas à organização do citoesqueleto, à saída de sinalização e à remodelação metabólica por meio de regulação dependente de isoformas. A desregulação do splicing mediado por MBNL tem sido implicada em mecanismos de doenças neuromusculares impulsionados por toxicidade de RNA e em perturbações mais amplas de splicing em todo o transcriptoma observadas em contextos de desenvolvimento e associados ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MBNL3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MBNL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MBNL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MBNL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MBNL3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MBNL3 para a investigação da sinalização de MBNL3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MBNL3 críticos para a função MBNL3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MBNL3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MBNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MBNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MBNL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MBNL3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MBNL3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MBNL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MBNL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.