MBL-C Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403131-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MBL-CO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MBL-C (h) e o Plasmídeo Double Nickase MBL-C (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MBL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MBL-C Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MBL-C Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBL2 codifica a lectina de ligação à manose (MBL-C), uma molécula solúvel de reconhecimento de padrões que inicia a via das lectinas do complemento ao se ligar a motivos de carboidratos microbianos e ativar as proteases MASP. Por meio da opsonização e da amplificação da cascata do complemento, a MBL-C contribui para a vigilância imune inata, a depuração de material apoptótico e a modulação do tônus inflamatório em sítios mucosos e sistêmicos. Variações na expressão de MBL2 ou na capacidade de oligomerização têm sido associadas a suscetibilidade alterada a infecções e a respostas inflamatórias desreguladas, e o gene é frequentemente avaliado como modificador de fenótipos imunológicos em contextos de sepse, doenças autoimunes e doenças inflamatórias crônicas. Como componente circulante produzido principalmente por hepatócitos, a MBL-C também fornece um marcador acessível para estudar mediadores imunes secretados, a dinâmica de ativação do complemento e vias de interação hospedeiro–patógeno.
MBL-C O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MBL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MBL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MBL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MBL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.