MATH-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404171-LAC

ATOH1（MATH-1）は、ヒトの発生過程において系譜の決定と分化プログラムを統括する、塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）型転写因子をコードする。MATH-1は、神経発生および上皮細胞の運命決定を制御する遺伝子ネットワークを調節し、Notch依存的な側方抑制、Wnt/β-カテニンシグナル伝達、クロマチンリモデリングと連携して前駆細胞の運命を規定する。ATOH1の発現や活性の破綻は、複数の組織コンテキストにおける分化状態の変化や異常増殖と関連づけられており、発生に根差した転写回路を研究するための分子学的な入口として有用であることが示唆されている。運命決定経路における結節点として、ATOH1は神経・感覚系系譜の規定、上皮恒常性、ならびに転写因子による細胞アイデンティティの再配線を扱うモデルで、しばしば解析対象となっている。

MATH-1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なATOH1の発現上昇を可能にします。

MATH-1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、ATOH1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性MATH-1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のATOH1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。