MARVELD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-413502

Übersicht

MARVELD1 (MARVEL domain containing 1) kodiert ein kleines, membranassoziiertes Protein, das eine MARVEL-Domäne (MAL and related proteins for vesicle trafficking and membrane link) enthält, was mit Funktionen bei der Organisation von Membran-Mikrodomänen und der Regulation der Dynamik transmembraner Proteine vereinbar ist. Berichtete Funktionen bringen MARVELD1 mit der Kontrolle von Zelladhäsion sowie Proliferations- und Differenzierungsprogrammen in Verbindung, mit nachgeschalteten Effekten auf Zellzyklus-Checkpoints und stressresponsive Signalwege. Eine veränderte MARVELD1-Expression wurde in mehreren Tumorkontexten beobachtet und wird häufig hinsichtlich ihres Zusammenhangs mit Invasion, metastaseassoziierten Phänotypen und Netzwerken der transkriptionellen Regulation untersucht. Dadurch dient MARVELD1 als nützlicher Knotenpunkt, um zu untersuchen, wie Membranorganisation mit Signalwegen zusammenwirkt, die die zelluläre Plastizität und onkogene Eigenschaften beeinflussen.

Das MARVELD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MARVELD1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MARVELD1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MARVELD1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MARVELD1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MARVELD1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MARVELD1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MARVELD1-Exone abzielen, die für die MARVELD1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MARVELD1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MARVELD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MARVELD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MARVELD1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MARVELD1 HDR-Plasmid (h) und MARVELD1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MARVELD1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MARVELD1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.