MARCKSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403985

概要

MARCKSL1（MARCKS-like 1）は、アクチン結合性で膜に関連するタンパク質をコードしており、リン酸化依存的なリン脂質およびアクチンネットワークとの相互作用を介して、細胞骨格の再構築、細胞形態、運動性を制御します。神経突起の伸長、細胞移動、接着動態に関わる過程で機能し、PKC などのキナーゼ下流のシグナルや、ラメリポディア形成を制御する経路からのシグナルを統合します。MARCKSL1 の発現変化は、複数の腫瘍コンテキストにおいて浸潤性の挙動や増殖プログラムの変化と関連づけられており、アクチン再編成が重要となる神経発生生物学の分野でも研究されています。これらの性質により、MARCKSL1 はアクチン駆動型の細胞表現型や、シグナルから細胞骨格への連関を解析するうえで有用な結節点（ノード）となります。

MARCKSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMARCKSL1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MARCKSL1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MARCKSL1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MARCKSL1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MARCKSL1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MARCKSL1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MARCKSL1の機能に不可欠なMARCKSL1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MARCKSL1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MARCKSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMARCKSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MARCKSL1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MARCKSL1 HDRプラスミド（h）および MARCKSL1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMARCKSL1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMARCKSL1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。