LSP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406808

概要

リンパ球特異的タンパク質1（LSP1）は、白血球および内皮細胞に豊富に発現する、Fアクチン結合性の細胞骨格制御因子であり、細胞形態、運動性、接着を協調的に調節します。免疫受容体やケモカイン刺激の下流にあるシグナル伝達ネットワークで機能し、インテグリン依存的なトラフィッキング、経内皮移行、ならびに細胞皮質におけるアクチン再構築の空間的な組織化に影響を与えます。これらの役割を通じて、LSP1は白血球の活性化ダイナミクス、抗原提示細胞の挙動、そして血管バリアとの相互作用に関与します。LSP1の発現や機能の異常は、炎症応答の変化や免疫細胞移動の表現型の変化と関連しており、免疫病理や血液疾患の病態生物学に関わる可能性が示されています。

LSP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLSP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LSP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LSP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LSP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LSP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LSP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LSP1の機能に不可欠なLSP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LSP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LSP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLSP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LSP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LSP1 HDRプラスミド（h）および LSP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLSP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLSP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。