Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LSD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401294-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LSD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LSD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LSD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KDM1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LSD1 Anticorpo (B-9): sc-271720
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LSD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401294-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LSD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401294-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDM1A codifica a desmetilase 1 específica de lisina (LSD1), uma amina oxidase dependente de FAD que remove marcas mono- e di-metiladas da histona H3 (principalmente H3K4 e, dependendo do contexto, H3K9) para modular a acessibilidade da cromatina e programas de transcrição. A LSD1 atua em complexos correpressores e de remodelamento de cromatina, como CoREST e NuRD, conectando a desmetilação de histonas à metilação do DNA, à regulação de enhancers e à expressão gênica específica de linhagem. Por meio desses mecanismos epigenéticos, a LSD1 influencia a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a manutenção de estados com características de células-tronco. A atividade desregulada de KDM1A e alterações na composição dos complexos de LSD1 têm sido associadas a controle transcricional aberrante em múltiplos cânceres e em outros distúrbios envolvendo desregulação epigenética.
LSD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KDM1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KDM1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KDM1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KDM1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.