LRSAM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407099
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRSAM1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LRSAM1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRSAM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407099 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
LRSAM1 (leucine rich repeat and sterile alpha motif containing 1) codifica uma ligase de ubiquitina E3 citosólica do tipo RING que contribui para o controle de qualidade proteico dependente de ubiquitina e para o tráfego endossomal por meio de interações com TSG101 e outros componentes da maquinaria ESCRT. Ao regular a ubiquitinação e a degradação de substratos específicos, a LRSAM1 influencia a triagem intracelular, a dinâmica de membranas e a homeostase neuronal. A disfunção de LRSAM1 tem sido associada à neuropatia periférica, incluindo a doença de Charcot–Marie–Tooth tipo 2P, destacando sua relevância para a manutenção axonal e vias de proteostase. Assim, LRSAM1 é de interesse para estudos de sinalização por ubiquitina, tráfego vesicular e respostas celulares ao estresse associadas à neurodegeneração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LRSAM1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LRSAM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LRSAM1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LRSAM1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LRSAM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LRSAM1 para a investigação da sinalização de LRSAM1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LRSAM1 críticos para a função LRSAM1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LRSAM1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LRSAM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LRSAM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LRSAM1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LRSAM1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LRSAM1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LRSAM1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LRSAM1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.