LRP16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405616

概要

MACROD1 は LRP16 をコードしており、LRP16 は ADP-リボースに結合する核内マクロドメイン含有タンパク質で、標的タンパク質のモノADPリボシル化を除去する「消去酵素」として機能します。LRP16 は、核内ホルモン受容体シグナル伝達とのクロストークや、DNA損傷応答に影響する PARP 依存的 ADP リボシル化経路を含む、転写プログラムやクロマチン関連プロセスの制御に関与します。これらの作用を通じて、MACROD1 は細胞周期制御、ストレスシグナル伝達、ゲノム安定性の維持に影響を及ぼし得ます。MACROD1/LRP16 の発現や機能の変化は複数の腫瘍環境で報告されており、増殖、生存シグナル、転写ネットワークの再編成との関連でしばしば研究されています。

LRP16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMACROD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MACROD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MACROD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LRP16タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LRP16シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MACROD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LRP16の機能に不可欠なMACROD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MACROD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LRP16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLRP16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MACROD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LRP16 HDRプラスミド（h）および LRP16 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMACROD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMACROD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。