Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402016
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRF/Pokemon O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LRF/Pokemon, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRF/Pokemon Anticorpo (13E9): sc-33683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402016 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ZBTB7A codifica o fator de transcrição LRF/Pokemon (também conhecido como FBI-1), uma proteína BTB/POZ e de dedos de zinco que se liga a elementos de DNA ricos em GC para modular programas de expressão gênica que controlam decisões de destino celular. Ele participa da repressão transcricional dependente de cromatina e interage com vias que regulam proliferação, diferenciação e comprometimento de linhagem, incluindo a regulação de genes metabólicos e de resposta ao estresse de maneira dependente do contexto. LRF/Pokemon está ligado à hematopoiese e ao desenvolvimento de células imunes e tem sido estudado por seus efeitos na maturação eritroide e na diferenciação linfoide. Alterações na atividade ou na expressão de ZBTB7A têm sido associadas a redes transcricionais desreguladas no câncer e em outros distúrbios proliferativos, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos de vias oncogênicas e de desenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LRF/Pokemon (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZBTB7A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZBTB7A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZBTB7A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LRF/Pokemon.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZBTB7A para a investigação da sinalização de LRF/Pokemon, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZBTB7A críticos para a função LRF/Pokemon
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZBTB7A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LRF/Pokemon Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZBTB7A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LRF/Pokemon Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LRF/Pokemon (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZBTB7A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZBTB7A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.