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LOXL2慢病毒激活颗粒(h) | sc-401021-LAC | 200 µl | $455.00 |
LOXL2(赖氨酰氧化酶样蛋白2)是一种铜依赖性的胺氧化酶,可催化胶原蛋白和弹性蛋白中赖氨酸残基的氧化脱胺反应,促进共价交联并驱动细胞外基质(ECM)重塑。通过调控基质刚度和细胞–基质相互作用,LOXL2影响细胞黏附、迁移、上皮–间质转化(EMT)程序以及成纤维细胞活化,并与TGF-β/SMAD信号及FAK/SRC、YAP/TAZ等力学转导通路相互整合。细胞内LOXL2也与染色质相关功能有关,可调控与细胞可塑性相关的转录状态。LOXL2表达失调与病理性纤维化及肿瘤微环境重塑相关,因此它是研究ECM驱动信号和人源细胞模型中侵袭性表型的一个重要节点。
LOXL2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 LOXL2 表达。
LOXL2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在LOXL2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性LOXL2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 LOXL2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。