LMP7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421450-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LMP7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LMP7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LMP7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Psmb8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LMP7 Anticorpo (D-2): sc-374089
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LMP7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421450-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMP7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421450-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Psmb8 codifica a subunidade catalítica do imunoproteassoma LMP7 (β5i), uma protease especializada que substitui componentes do proteassoma constitutivo em resposta a estímulos inflamatórios, como a sinalização por interferons. A LMP7 modula a proteólise na via ubiquitina–proteassoma e molda o repertório de peptídeos gerados para apresentação de antígenos pelo MHC classe I, influenciando a vigilância imunológica adaptativa. Em células imunes de camundongos, a atividade do imunoproteassoma contribui para a proteostase sob estresse oxidativo ou inflamatório e afeta programas inflamatórios associados ao NF-κB. Alterações na função de PSMB8/LMP7 têm sido associadas a processamento de antígenos desregulado e a fenótipos inflamatórios, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos de regulação imune e imunopatologia.
LMP7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Psmb8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Psmb8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Psmb8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Psmb8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.