Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LMP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401615-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LMP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LMP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LMP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PSMB9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LMP2 Anticorpo (G-3): sc-373996
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LMP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PSMB9 codifica a subunidade catalítica do imunoproteassoma humano LMP2 (β1i), que substitui a subunidade constitutiva β1 em resposta ao interferon-γ e a outros estímulos inflamatórios. A LMP2 contribui para a proteólise dependente de ubiquitina e molda o repertório de peptídeos gerado para o processamento e a apresentação de antígenos por MHC classe I, influenciando assim o reconhecimento por linfócitos T CD8+. Por meio do seu papel na montagem do imunoproteassoma e nas preferências de clivagem do proteassoma, o PSMB9 conecta a sinalização inflamatória inata à vigilância imunológica adaptativa e à homeostase proteica celular. Alterações na atividade ou na expressão de PSMB9 têm sido associadas a desregulação da apresentação de antígenos e a fenótipos inflamatórios relevantes para autoimunidade, biologia de infecções e interações imunes em tumores.
LMP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PSMB9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PSMB9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PSMB9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PSMB9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.