LMO2 Plasmide Double Nickase (m): sc-421447-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LMO2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LMO2 Double Nickase Plasmid (m) e il LMO2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Lmo2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LMO2 Antibody (1A9-1): sc-65736
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LMO2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMO2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lmo2 codifica la proteina LMO2, contenente esclusivamente domini LIM, un adattatore nucleare che assembla complessi trascrizionali multiproteici in grado di controllare le decisioni sul destino cellulare. Nell’ematopoiesi murina, LMO2 partecipa a reti regolatorie con fattori quali TAL1/SCL, le proteine GATA e LDB1 per coordinare programmi di espressione genica che supportano il mantenimento di cellule staminali e progenitrici, la differenziazione eritroide e lo sviluppo vascolare. I circuiti trascrizionali associati a LMO2 si intersecano con processi più ampi di rimodellamento della cromatina e di specificazione di linea, che influenzano le dinamiche di proliferazione e differenziazione. L’espressione deregolata di Lmo2 o una composizione alterata dei complessi è ampiamente utilizzata come modello per studiare i meccanismi di riprogrammazione trascrizionale leucemogenica e la biologia delle patologie ematologiche correlate in vivo e in cellule coltivate.
LMO2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Lmo2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Lmo2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Lmo2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Lmo2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.