leupaxin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405101-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- leupaxinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase leupaxin (h) e o Plasmídeo Double Nickase leupaxin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LPXN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:leupaxin Anticorpo (B-2): sc-376820
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
leupaxin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405101-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
leupaxin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405101-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **LPXN** codifica a **leupaxina**, uma proteína adaptadora com domínios LIM da família da paxilina que se localiza nas adesões focais e conecta o engajamento de integrinas à sinalização a jusante. Por meio de interações com complexos do citoesqueleto e de tirosina-quinases, a leupaxina modula a adesão e a migração celular e a mecanotransdução, influenciando a renovação das adesões focais e a dinâmica da actina. A sinalização dependente de LPXN se integra a vias como **FAK/SRC**, a regulação de **GTPases da família Rho** e as cascatas de **MAPK**, que coordenam a motilidade celular e sinais de sobrevivência. Alterações na expressão de leupaxina ou na reorganização das adesões focais têm sido associadas a fenótipos celulares invasivos na biologia do câncer e a um tráfego desregulado de células imunes, tornando o LPXN um ponto útil para o estudo de mecanismos de doença ligados à adesão.
leupaxin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LPXN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LPXN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LPXN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LPXN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.