LCAT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405225-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LCATO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LCAT (h) e o Plasmídeo Double Nickase LCAT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LCAT. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LCAT Anticorpo (D-2): sc-376682
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LCAT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405225-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LCAT Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405225-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A LCAT humana (lecitina–colesterol aciltransferase) é uma enzima secretada que catalisa a esterificação do colesterol livre na superfície das lipoproteínas, gerando ésteres de colesterol que favorecem a maturação da HDL e o transporte reverso de colesterol. Ao remodelar fosfolipídios e regular a composição das partículas de lipoproteínas, a LCAT influencia vias de homeostase lipídica ligadas ao efluxo de colesterol, à função de apolipoproteínas e ao tráfego sistêmico de lipídios. Alterações na atividade da LCAT estão associadas a fenótipos de dislipidemia e a perfis lipoproteicos anormais, tornando-a relevante para estudos mecanísticos da biologia do risco cardiometabólico. Em sistemas experimentais, a perturbação de LCAT é usada para dissecar relações entre a biogênese de HDL, o manuseio de colesterol por macrófagos e a sinalização inflamatória impulsionada por lipídios.
LCAT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LCAT em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LCAT. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LCAT. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LCAT interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.