LAMP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400120

Visão geral

LAMP1 (proteína 1 de membrana associada aos lisossomos) é uma importante glicoproteína transmembranar do tipo I de endossomos tardios e lisossomos, que ajuda a manter a integridade lisossomal e participa do tráfego vesicular, da fusão endossomo–lisossomo e do fluxo autofagia–lisossomo. Ao contribuir para o posicionamento dos lisossomos, a proteção da membrana e a capacidade degradativa, a LAMP1 influencia o processamento de antígenos, a renovação de proteínas de membrana e as respostas celulares ao estresse por privação de nutrientes. Alterações na abundância ou na localização da LAMP1 são frequentemente usadas como indicador de biogênese lisossomal e de respostas ao estresse, e estão ligadas a vias relevantes para neurodegeneração, infecção e adaptação de células cancerosas. A LAMP1 também é comumente utilizada como marcador lisossomal em estudos da dinâmica de organelas e de redes de sinalização relacionadas aos lisossomos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LAMP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LAMP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LAMP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LAMP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LAMP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LAMP1 para a investigação da sinalização de LAMP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LAMP1 críticos para a função LAMP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LAMP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LAMP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LAMP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LAMP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LAMP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LAMP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LAMP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LAMP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.