Lamin B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401873

Visão geral

LMNB2 codifica a lamina B2, uma proteína essencial de filamento intermediário tipo V da lâmina nuclear que sustenta a arquitetura do envelope nuclear e a organização da cromatina. A lamina B2 contribui para a replicação do DNA, a regulação transcricional e a remontagem nuclear mitótica, integrando funções estruturais e regulatórias na mecânica nuclear e na estabilidade do genoma. Como parte da rede mais ampla de laminas, influencia processos como o posicionamento dos poros nucleares e a ancoragem de domínios associados à lâmina (LADs), que moldam o estado epigenético e a diferenciação celular. A desregulação de componentes da lâmina nuclear, incluindo o LMNB2, está ligada a alterações na morfologia nuclear e tem sido associada a fenótipos neurodesenvolvimentais e proliferativos relevantes para pesquisas em mecanobiologia e manutenção do genoma.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Lamin B2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LMNB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LMNB2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LMNB2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Lamin B2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LMNB2 para a investigação da sinalização de Lamin B2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LMNB2 críticos para a função Lamin B2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LMNB2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Lamin B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Lamin B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LMNB2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Lamin B2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Lamin B2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LMNB2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LMNB2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.