Lamin B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401873

概要

LMNB2は、核膜ラミナの必須構成要素であるV型中間径フィラメントタンパク質ラミンB2をコードしており、核膜の構造維持とクロマチンの組織化を支えます。ラミンB2はDNA複製、転写制御、有糸分裂後の核再構築に関与し、核の力学特性やゲノム安定性において構造的役割と制御的役割を統合しています。より広範なラミンネットワークの一部として、核膜孔の配置やラミナ関連ドメイン（LAD）の係留など、エピジェネティック状態や細胞分化を形作る過程にも影響します。LMNB2を含む核膜ラミナ構成因子の制御不全は核形態の変化と関連しており、力学生物学およびゲノム維持の研究において重要な、神経発生や細胞増殖に関わる表現型との関連が示されています。

Lamin B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLMNB2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LMNB2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LMNB2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Lamin B2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Lamin B2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LMNB2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Lamin B2の機能に不可欠なLMNB2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LMNB2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Lamin B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLamin B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LMNB2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Lamin B2 HDRプラスミド（h）および Lamin B2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLMNB2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLMNB2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。