Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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L-type Ca++ CP γ8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407391
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- L-type Ca++ CP γ8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico L-type Ca++ CP γ8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:L-type Ca++ CP γ8 Anticorpo (A-8): sc-514421
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
L-type Ca++ CP γ8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407391 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CACNG8 codifica a subunidade auxiliar γ8 do canal de Ca++ do tipo L, um regulador transmembranar que modula o tráfego, a abertura/fechamento (gating) e a estabilidade na membrana de complexos de canais de cálcio dependentes de voltagem em células excitáveis. Ao ajustar o influxo de Ca2+, a γ8 influencia redes de sinalização dependentes de cálcio que conectam a despolarização da membrana a vias a jusante que controlam a excitabilidade neuronal, a transmissão sináptica e a expressão gênica dependente de atividade. Alterações na função de CACNG8 têm sido implicadas em fenótipos neurofisiológicos e podem contribuir para mecanismos relevantes para a suscetibilidade a crises epilépticas e outros distúrbios ligados à desregulação da sinalização de cálcio. Como componente de montagens macromoleculares de canais iônicos, CACNG8 oferece uma via para estudar a composição do complexo de canais e as consequências celulares da perturbação de subunidades auxiliares.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO L-type Ca++ CP γ8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CACNG8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CACNG8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CACNG8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína L-type Ca++ CP γ8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CACNG8 para a investigação da sinalização de L-type Ca++ CP γ8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CACNG8 críticos para a função L-type Ca++ CP γ8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CACNG8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo L-type Ca++ CP γ8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo L-type Ca++ CP γ8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CACNG8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo L-type Ca++ CP γ8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR L-type Ca++ CP γ8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CACNG8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CACNG8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.