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KIR6.2双切口酶质粒(h) | sc-401139-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KIR6.2双切口酶质粒(h2) | sc-401139-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNJ11 编码内向整流钾通道亚基 KIR6.2,是 ATP 敏感性 K+(KATP)通道的核心组成部分,可将细胞代谢状态与膜兴奋性相耦联。在胰腺 β 细胞中,KIR6.2 有助于设定静息膜电位,并通过整合 ATP/ADP 依赖性的通道门控与胞质 Ca2+ 内流变化,调控葡萄糖刺激的胰岛素分泌。在心脏和骨骼肌等兴奋性组织中,KATP 通道可调节动作电位时程,并通过电生理适应在代谢应激下发挥保护作用。KCNJ11 的遗传变异或调控异常与胰岛素分泌及葡萄糖稳态紊乱相关,因此它也是代谢信号传导与离子通道生理研究中常用的靶点。
KIR6.2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KCNJ11 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KCNJ11内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KCNJ11的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KCNJ11基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。