KIR3DL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406227

Visão geral

KIR3DL3 codifica um receptor inibitório do tipo imunoglobulina de células NK (killer cell immunoglobulin-like receptor), expresso em subpopulações de células NK e de células T, no qual contribui para a vigilância imunitária ao atenuar a citotoxicidade e a libertação de citocinas através do recrutamento, dependente de ITIM, de fosfatases como SHP-1/2. Ao modular a sinalização a jusante de recetores ativadores, o KIR3DL3 ajuda a ajustar o equilíbrio entre ativação imunitária e tolerância, influenciando vias que regulam a função efetora dos linfócitos e o reconhecimento de células-alvo. A variação no conteúdo e na expressão dos genes KIR é frequentemente estudada no contexto de interações imunitárias dependentes de HLA, com implicações para a imunologia tumoral, as respostas antivirais e a imunobiologia dos transplantes. A desregulação da sinalização de recetores inibitórios pode alterar os “set points” do sistema imunitário em infeções crónicas, autoimunidade e evasão imunitária associada ao cancro, tornando o KIR3DL3 um alvo útil para estudos mecanísticos de regulação inibitória do tipo checkpoint em linfócitos inatos e inato-semelhantes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIR3DL3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KIR3DL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KIR3DL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KIR3DL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIR3DL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KIR3DL3 para a investigação da sinalização de KIR3DL3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KIR3DL3 críticos para a função KIR3DL3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KIR3DL3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KIR3DL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIR3DL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KIR3DL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KIR3DL3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIR3DL3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KIR3DL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KIR3DL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.