Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
KIBRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402677
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KIBRA O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KIBRA, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KIBRA Anticorpo (B-3): sc-518263
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KIBRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402677 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
WWC1 codifica a KIBRA, uma proteína de ancoragem (scaffold) com domínio WW, enriquecida no cérebro e no rim, que coordena interações proteína–proteína por meio de seus domínios WW e C2. A KIBRA participa da regulação da via Hippo por meio de interações com as quinases LATS e componentes relacionados, conectando a polaridade celular, a inibição por contato e o controle transcricional da proliferação e da apoptose. Ela também se integra a vias de tráfego de membranas e remodelamento do citoesqueleto, sustentando processos como endocitose e migração direcionada. A desregulação da sinalização WWC1/KIBRA tem sido associada a alterações na plasticidade sináptica e tem sido investigada no contexto do controle de crescimento relevante para o câncer e da neurobiologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIBRA (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WWC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WWC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WWC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIBRA.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WWC1 para a investigação da sinalização de KIBRA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WWC1 críticos para a função KIBRA
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WWC1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KIBRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIBRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WWC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KIBRA Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIBRA (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WWC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WWC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.