KDEL receptor 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430617

Visão geral

Kdelr3 codifica o receptor KDEL 3, um receptor de recuperação residente no complexo de Golgi que reconhece o motivo KDEL na extremidade C-terminal de chaperonas luminais do RE que escaparam e as devolve do Golgi ao retículo endoplasmático por meio de tráfego retrógrado dependente de COPI. Ao manter a proteostase do RE e a homeostase do cálcio, o KDELR3 influencia a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR), a fidelidade da via secretória e a remodelação adaptativa ao estresse do compartimento secretório inicial. A perturbação da recuperação mediada por receptores KDEL pode alterar a maturação de glicoproteínas e a sensibilidade ao estresse do RE, processos frequentemente explorados em estudos de neurodegeneração, estresse metabólico e das demandas secretórias de células tumorais. Em sistemas murinos, Kdelr3 oferece um ponto de estudo manejável para dissecar como o transporte entre RE e Golgi se conecta a redes de proteostase e a transições de estado celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KDEL receptor 3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Kdelr3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Kdelr3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Kdelr3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KDEL receptor 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Kdelr3 para a investigação da sinalização de KDEL receptor 3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Kdelr3 críticos para a função KDEL receptor 3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Kdelr3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KDEL receptor 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo KDEL receptor 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Kdelr3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KDEL receptor 3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR KDEL receptor 3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Kdelr3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Kdelr3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.