KCTD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406758

Visão geral

KCTD1 (domínio de tetramerização de canal de potássio contendo 1) codifica uma proteína que contém um domínio BTB/POZ, implicada em redes de interação proteína–proteína que influenciam o controle da transcrição e programas de diferenciação celular. Membros da família KCTD comumente atuam como proteínas adaptadoras em complexos de ligase E3 de ubiquitina baseados em Cullin3 (CUL3), conectando substratos específicos à degradação mediada por ubiquitina e, assim, moldando as saídas de sinalização. Por meio dessas funções regulatórias, KCTD1 tem sido associada a processos de desenvolvimento e à manutenção da identidade celular, com sua disrupção genética ligada a distúrbios congênitos que afetam tecidos ectodérmicos. Na pesquisa biomédica, KCTD1 é estudada no contexto da modulação de vias, da proteostase e de circuitos regulatórios gênicos relevantes para fenótipos de doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KCTD1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCTD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCTD1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCTD1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KCTD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCTD1 para a investigação da sinalização de KCTD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCTD1 críticos para a função KCTD1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCTD1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KCTD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KCTD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCTD1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KCTD1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KCTD1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCTD1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCTD1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.