KCNQ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403544

概要

KCNQ3は、神経性M電流を担う電位依存性カリウムチャネルのKv7.3サブユニットをコードしており、膜興奮性およびスパイク頻度適応の主要な調節因子です。サブスレッショルド領域のコンダクタンスを形成することで、KCNQ3は活動電位の閾値、シナプス統合、ネットワーク振動を制御する経路に関与し、しばしばKCNQ2を含むチャネル複合体と協調して機能します。KCNQ3を介する電流が障害されると神経発火ダイナミクスが変化し、神経発達障害やてんかん性の表現型との関連が報告されていることから、大脳皮質回路機能の研究において重要です。KCNQ3はまた、興奮性関連シグナル伝達を検討するイオンチャネル薬理学および電気生理学ワークフローにおける機能的リードアウト標的としても用いられます。

KCNQ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKCNQ3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KCNQ3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KCNQ3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KCNQ3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KCNQ3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KCNQ3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KCNQ3の機能に不可欠なKCNQ3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KCNQ3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KCNQ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKCNQ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KCNQ3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KCNQ3 HDRプラスミド（h）および KCNQ3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKCNQ3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKCNQ3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。