KCNH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405756
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KCNH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KCNH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KCNH1 Anticorpo (C-11): sc-398585
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KCNH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405756 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KCNH1 codifica um canal de potássio dependente de voltagem (Kv10.1/Eag1) que regula o potencial de membrana e o fluxo de potássio, moldando a excitabilidade celular e a sinalização subsequente dependente de cálcio. Para além das propriedades elétricas, a atividade de KCNH1 influencia a progressão do ciclo celular, a proliferação e a dinâmica do citoesqueleto por meio de mecanismos de controlo bioelétrico e de modulação do canal dependente de fosforilação. A expressão de KCNH1 foi relatada em contextos neurais e não neurais, associando a atividade do canal a processos como padrões de disparo neuronal e sinalização dependente de estímulos. A desregulação de KCNH1 está associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e tem sido estudada no contexto de sinalização de crescimento aberrante na biologia do cancro, sustentando o seu uso em estudos mecanísticos de vias conduzidas por canais iónicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KCNH1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNH1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNH1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KCNH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNH1 para a investigação da sinalização de KCNH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNH1 críticos para a função KCNH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNH1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KCNH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KCNH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNH1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KCNH1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KCNH1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNH1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNH1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.