KBTBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409349

概要

KBTBD6（kelch repeat and BTB domain containing 6）は、CUL3（カリリン3）依存性E3ユビキチンリガーゼ複合体において基質アダプターとして機能すると予測される、BTB–BACK–Kelchファミリータンパク質をコードします。BTBドメインを介したカリリン結合と、Kelchドメイン依存的な基質認識により、KBTBD6は細胞周期の進行、細胞骨格の構築、ストレス応答性シグナル伝達を制御するタンパク質のユビキチン化およびプロテアソーム分解（ターンオーバー）を調節し得る位置づけにあります。これらのタンパク質品質管理プロセスは、ユビキチン依存的分解や、それに関連する転写・増殖プログラムなどの経路に影響します。ユビキチンリガーゼのアダプターの機能異常は、がんをはじめとする疾患でみられるプロテオスタシスやシグナル状態の変化としばしば関連するため、KBTBD6はユビキチン介在性制御の機序研究において重要な標的となります。

KBTBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKBTBD6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KBTBD6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KBTBD6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KBTBD6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KBTBD6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KBTBD6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KBTBD6の機能に不可欠なKBTBD6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KBTBD6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KBTBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKBTBD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KBTBD6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KBTBD6 HDRプラスミド（h）および KBTBD6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKBTBD6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKBTBD6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。