Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin 13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404551
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- karyopherin 13 CRISPR/Cas9 ノックアウト（KO）プラスミド（h）は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA（gRNA）をそれぞれコードするプラスミドのプールです
- gRNA配列は、Cas9を誘導してkaryopherin 13ゲノム座において部位特異的な二本鎖切断（DSBs）を引き起こし、非相同末端結合（NHEJ）を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
- ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ（Creベクター：sc-418923）を用いて選択マーカーを除去することができる。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: karyopherin 13 抗体 (D-3): sc-271218
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
karyopherin 13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h) | sc-404551 | 20 µg | $397.00 |
概要
IPO13はカリオフェリン13（インポーチン13）をコードしており、核膜孔複合体を介して特定のタンパク質カーゴをRanGTP依存的に核内外へ往復輸送する双方向性の核輸送受容体です。核内への取り込み／核外への輸送の動態を制御することで、IPO13はカーゴの局在と利用可能性を調節し、転写プログラム、細胞周期進行、ストレス応答性シグナル伝達に影響を与えます。核・細胞質間輸送の異常はがん化や神経変性の表現型で繰り返し見られる特徴であり、IPO13は、輸送の忠実性がゲノム制御やプロテオスタシスにどのように影響するかを研究するうえで重要な結節点となります。さらにIPO13の機能は、調節因子の核内アクセスが律速となり得る宿主―病原体相互作用や自然免疫シグナル伝達においても重要です。
karyopherin 13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIPO13遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IPO13内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。
このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IPO13のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、karyopherin 13タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。
このCRISPRノックアウトシステムにより、karyopherin 13シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IPO13欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。
主な特徴
- karyopherin 13の機能に不可欠なIPO13エクソンを標的とするsgRNA
導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
ノックアウト効率を向上させるための、IPO13ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
トランスフェクションによる導入に対応
設計バリエーション
CRISPRs +/- HDR
- karyopherin 13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびkaryopherin 13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IPO13遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
karyopherin 13 HDRプラスミド（h）および karyopherin 13 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIPO13ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIPO13標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。