Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Kaiso Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417904
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Kaiso El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Kaiso, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Kaiso Anticuerpo (D-10): sc-365428
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Kaiso Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417904 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ZBTB33 codifica Kaiso, un factor de transcripción con dedos de zinc y dominio BTB/POZ que se une a sitios de unión específicos de Kaiso y a dinucleótidos CpG metilados para modular programas de expresión génica. Mediante interacciones con complejos correpresores y componentes de señalización de la familia de las cateninas, Kaiso ayuda a coordinar la represión transcripcional dependiente de la cromatina y el cambio transcripcional dependiente del contexto. Las redes reguladas por Kaiso se intersecan con vías que controlan la diferenciación epitelial, la adhesión célula–célula y las salidas transcripcionales asociadas a Wnt/β-catenina. La actividad desregulada de ZBTB33 o una ocupación alterada de Kaiso se ha estudiado en biología del cáncer, donde el estado epigenético y la reprogramación transcripcional contribuyen a fenotipos invasivos y a la progresión tumoral.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Kaiso (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZBTB33 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZBTB33 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZBTB33 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Kaiso.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZBTB33 para la investigación de la señalización de Kaiso, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ZBTB33 críticos para la función de Kaiso
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZBTB33 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Kaiso CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Kaiso CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZBTB33. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Kaiso (h) y el plásmido HDR Kaiso (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZBTB33 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZBTB33 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.