Junctophilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401805

概要

JPH2 は、横紋筋において細胞膜／T 管と筋小胞体の間に形成される接合膜複合体を安定化する膜係留タンパク質であるジャンクトフィリン-2（Junctophilin-2）をコードします。L 型 Ca²⁺ チャネルとリアノジン受容体のナノスケールでのカップリングを維持することで、ジャンクトフィリン-2 は興奮収縮連関と効率的な細胞内 Ca²⁺ 放出を支えます。JPH2 の機能は、収縮性、電気的シグナル伝達、ならびに Ca²⁺ 依存性の転写プログラムに影響する Ca²⁺ 取扱い経路と交差します。JPH2 の発現量や構造的配置の変化は、心筋細胞の T 管リモデリングや Ca²⁺ 恒常性の破綻と関連づけられており、これらは実験モデルにおいて遺伝性および後天性の心筋症や不整脈原性の表現型に伴う特徴として報告されています。

Junctophilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるJPH2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、JPH2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、JPH2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Junctophilin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Junctophilin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、JPH2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Junctophilin-2の機能に不可欠なJPH2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、JPH2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Junctophilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびJunctophilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、JPH2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Junctophilin-2 HDRプラスミド（h）および Junctophilin-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはJPH2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のJPH2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。