JMJD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406639

概要

JMJD4は、翻訳後修飾としての水酸化反応に関与し、タンパク質の安定性や機能に影響を与えうる、JmjCドメイン含有の2-オキソグルタル酸依存性オキシゲナーゼをコードしています。JMJD4の活性は、リボソーム因子やRNA結合因子の修飾を介して翻訳関連プロセスを制御し、その結果としてプロテオスタシスや細胞ストレス応答に影響を及ぼすことと関連付けられています。オキシゲナーゼ反応を遺伝子発現制御に結び付けることから、JMJD4は代謝センシング、低酸素に関連するシグナル伝達、翻訳装置の適応的リモデリングに関わる経路で研究されています。これらのプロセスの破綻は、増殖性の状態やストレス適応状態と関係するため、JMJD4はがん生物学および関連する転写・翻訳制御プログラムの機構研究において有用な標的となります。

JMJD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるJMJD4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、JMJD4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、JMJD4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、JMJD4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、JMJD4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、JMJD4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• JMJD4の機能に不可欠なJMJD4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、JMJD4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• JMJD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびJMJD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、JMJD4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  JMJD4 HDRプラスミド（h）および JMJD4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはJMJD4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のJMJD4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。