JMJD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406639

Visão geral

JMJD4 codifica uma oxigenase dependente de 2-oxoglutarato que contém um domínio JmjC, implicada em reações de hidroxilação pós-traducionais que podem influenciar a estabilidade e a função das proteínas. A atividade de JMJD4 tem sido associada à regulação de processos ligados à tradução por meio da modificação de fatores ribossomais e de ligação a RNA, com efeitos a jusante sobre a proteostase e as respostas celulares ao estresse. Ao conectar a química de oxigenases ao controle da expressão gênica, JMJD4 é estudada em vias que envolvem detecção metabólica, sinalização associada à hipóxia e remodelação adaptativa da maquinaria de tradução. A desregulação desses processos é relevante para estados proliferativos e adaptados ao estresse, tornando JMJD4 um alvo útil para estudos mecanísticos em biologia do câncer e em programas relacionados de controle transcricional/traducional.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO JMJD4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene JMJD4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do JMJD4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do JMJD4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína JMJD4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de JMJD4 para a investigação da sinalização de JMJD4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) JMJD4 críticos para a função JMJD4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos JMJD4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo JMJD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo JMJD4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus JMJD4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo JMJD4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR JMJD4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia JMJD4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo JMJD4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.