Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ISYNA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404785
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ISYNA1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ISYNA1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ISYNA1 Anticorpo (C-9): sc-271830
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ISYNA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404785 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ISYNA1 (inositol-3-fosfato sintase 1) codifica a enzima limitante de velocidade que converte glicose-6-fosfato em mio-inositol-3-fosfato, fornecendo um ponto de entrada fundamental na biossíntese de novo de mio-inositol. O mio-inositol fornece precursores para o fosfatidilinositol e para lipídios de sinalização fosfoinositídeos que regulam o tráfego de membranas, a sinalização acoplada a receptores, a dinâmica do citoesqueleto e a homeostase do cálcio intracelular. Por sua contribuição para o metabolismo de PI/PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3, a ISYNA1 influencia vias como PI3K–AKT e a sinalização impulsionada por PLC, que moldam proliferação, respostas ao estresse e diferenciação. Alterações na homeostase de inositol e fosfoinositídeos têm sido implicadas em fenótipos metabólicos e de neurodesenvolvimento, tornando a ISYNA1 um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização e dinâmica de membranas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ISYNA1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ISYNA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ISYNA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ISYNA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ISYNA1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ISYNA1 para a investigação da sinalização de ISYNA1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ISYNA1 críticos para a função ISYNA1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ISYNA1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ISYNA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ISYNA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ISYNA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ISYNA1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ISYNA1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ISYNA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ISYNA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.