IP3R-I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400986

개요

ITPR1은 이노시톨 1,4,5-삼인산 수용체 1형(IP3R-I)을 암호화하며, 이는 소포체(ER) 막에 존재하는 Ca²⁺ 방출 채널로서 PLC에 결합된 수용체 하위에서 생성된 IP₃ 신호를 세포질 및 미토콘드리아의 칼슘 과도(transient) 신호로 변환합니다. IP3R-I 매개 Ca²⁺ 흐름은 흥분–전사 결합, 시냅스 가소성, 분비, 세포사멸을 조절하고, GPCR/RTK–PLCβ/γ–IP₃ 신호전달, 칼모듈린/CaMK, 칼시뉴린–NFAT, ER–미토콘드리아 접촉 부위의 신호 전달 등과 같은 경로와 통합적으로 연동됩니다. ITPR1 활성은 칼슘 항상성과 스트레스 반응을 형성하여 신경세포 발화, 자가포식, 미접힌 단백질 반응(UPR) 신호 등 다양한 세포 표현형에 영향을 줍니다. ITPR1의 유전적 변이 또는 발현/기능 이상은 척수소뇌실조증(spinocerebellar ataxia) 표현형을 포함한 신경학적 기능장애와 연관되어 있어, 인간 세포에서 칼슘 신호전달의 기전을 연구하는 데 유용한 표적입니다.

IP3R-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ITPR1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ITPR1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ITPR1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 IP3R-I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 IP3R-I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ITPR1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• IP3R-I 기능에 중요한 ITPR1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ITPR1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• IP3R-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 IP3R-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ITPR1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  IP3R-I HDR 플라스미드 (h) 및 IP3R-I HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ITPR1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ITPR1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.