IL-1RAcP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421101

概要

Il1rapはIL-1RAcPをコードしており、IL-1受容体ファミリーのメンバーと複合体を形成して、IL-1α/IL-1βおよび関連リガンドによって開始されるシグナルを伝達するために不可欠な共受容体である。受容体がリガンドと結合すると、IL-1RAcPはMyD88依存性シグナル伝達複合体の組み立てを支え、IRAK–TRAF6カスケードを活性化することでNF-κBおよびMAPK経路を作動させ、炎症、自然免疫応答、ならびに間質—免疫のコミュニケーションを制御する下流の転写プログラムを誘導する。マウスモデルでは、IL-1R/IL-1RAcPシグナルの改変が、さまざまな臓器系における慢性炎症状態を駆動する機構、組織傷害応答、そしてサイトカインによって増幅されるリモデリングの解明にしばしば用いられる。IL-1RAcPはIL-1ファミリーからの複数の入力を統合するため、白血球のリクルート、バリア機能、炎症関連遺伝子発現を形作る経路間クロストークを解析する上でも重要である。

IL-1RAcP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl1rap遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il1rap内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il1rapのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-1RAcPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-1RAcPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il1rap欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-1RAcPの機能に不可欠なIl1rapエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il1rapゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-1RAcP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-1RAcP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il1rap遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-1RAcP HDRプラスミド（m）および IL-1RAcP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl1rapホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl1rap標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。